IPTG CAS:367-93-1 מחיר יצרן
Isopropyl β-D-1-thiogalactopyranoside (IPTG) הוא אנלוגי סינתטי של לקטוז שנמצא בשימוש נפוץ במחקר ביולוגיה מולקולרית ויישומי ביוטכנולוגיה.IPTG משמש בעיקר להשראת ביטוי של גנים במערכות חיידקיות, שם הוא משמש כטריגר מולקולרי לתחילת השעתוק של גני מטרה.
כאשר מוסיפים למצע הגידול, IPTG נקלט על ידי החיידקים ויכול להיקשר לחלבון lac repressor, ולמנוע ממנו לחסום את פעילות ה-lac operon.ה-lac operon הוא מקבץ של גנים המעורבים בחילוף החומרים של לקטוז, וכאשר מסירים את החלבון המדכא, הגנים באים לידי ביטוי.
לעתים קרובות נעשה שימוש ב-IPTG בשילוב עם פרומטור המוטנטי lacUV5, שהוא גרסה פעילה מבחינה מכוננת של פרומטור lac.על ידי שילוב אינדוקציה של IPTG עם מקדם מוטנטי זה, החוקרים יכולים להשיג רמות גבוהות של ביטוי גנים.זה מאפשר ייצור של כמויות גדולות של חלבון לטיהור או יישומים אחרים במורד הזרם.
בנוסף לביטוי גנים, IPTG משמש לעתים קרובות גם במבחני סקר כחול/לבן.בטכניקה זו, הגן lacZ מאוחה בדרך כלל לגן בעל עניין, וחיידקים המבטאים בהצלחה את גן היתוך זה ייצרו אנזים β-galactosidase פעיל.כאשר מוסיפים IPTG יחד עם מצע כרומוגני כמו X-gal, חיידקים המבטאים את גן ההיתוך הופכים לכחולים עקב פעילות β-galactosidase.זה מאפשר זיהוי ובחירה של זנים רקומביננטיים ששילבו בהצלחה את הגן המעניין.
אינדוקציה של ביטוי גנים: IPTG משמש בדרך כלל כדי לגרום לביטוי של גנים מטרה במערכות חיידקיות.הוא מחקה את הלקטוז הגורם הטבעי ונקשר לחלבון ה-lac repressor, ומונע ממנו לחסום את lac operon.זה מאפשר שעתוק וביטוי של הגנים הרצויים.
ביטוי וטיהור חלבון: אינדוקציה של IPTG משמשת לעתים קרובות לייצור כמויות גדולות של חלבונים רקומביננטיים למטרות שונות, כגון מחקרים ביוכימיים, ייצור טיפולי או ניתוח מבני.על ידי שימוש בוקטורי ביטוי מתאימים והשראת IPTG, החוקרים יכולים להשיג רמות גבוהות של ייצור חלבון מטרה במארחים חיידקיים.
סקר כחול/לבן: נעשה שימוש תכוף ב-IPTG בשילוב עם הגן lacZ ומצע כרומוגני, כגון X-gal, עבור מבחני סקר כחול/לבן.הגן lacZ מאוחה בדרך כלל לגן המעניין, וחיידקים המבטאים בהצלחה את גן היתוך זה ייצרו אנזים β-galactosidase פעיל.כאשר מוסיפים IPTG והמצע הכרומוגני, זנים רקומביננטיים המבטאים את גן ההיתוך הופכים לכחולים, מה שמאפשר זיהוי ובחירה קלים.
מחקר של ויסות גנים: אינדוקציה של IPTG משמשת בדרך כלל במחקר כדי לחקור את ויסות הגנים והאופרונים, במיוחד ה-lac operon.על ידי מניפולציה של ריכוזי IPTG וניטור הביטוי של רכיבי לאק אופרון, החוקרים יכולים לחקור את מנגנוני ויסות הגנים ואת תפקידם של גורמים או מוטציות שונות.
מערכות ביטוי גנים: IPTG הוא מרכיב מכריע במספר מערכות ביטוי גנים, כגון מערכות מבוססות פרומטור T7.במערכות אלה, ה-lac promotor משמש לעתים קרובות כדי להניע את הביטוי של T7 RNA פולימראז, אשר, בתורו, מתמלל גנים מטרה בשליטה של רצפי פרומטור T7.IPTG משמש להשראת הביטוי של T7 RNA פולימראז, מה שמוביל להפעלה של ביטוי גן מטרה.
| הרכב | C9H18O5S |
| בדיקה | 99% |
| מראה חיצוני | אבקה לבנה |
| מס' CAS | 367-93-1 |
| אֲרִיזָה | קטן ותפזורת |
| חיי מדף | 2 שנים |
| אִחסוּן | אחסן באזור קריר ויבש |
| תעודה | ISO. |
